荧光定量PCR反应中,Mg2+的浓度对Taq酶的活性是至关重要的,以DNA或cDNA为模板的PCR反应中最好的Mg2+浓度是
A. 0.2~0.5mM
B. 1~2mM
C. 2~5mM
D. 6~8mM
E. 0.5~2mM
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实时荧光PCR中,GC含量在20%-80%(45%-55%最佳),单链引物的最适长度为
A. 35-50bp
B. 15-20bp
C. 55-70bp
D. 5-20bp
E. 70-90bp
SYBR Green I技术常要求扩增片段不大于
A. 50bp
B. 100bp
C. 200bp
D. 300bp
E. 400bp
TaqMan探针技术要求扩增片段应在
A. 50-150bp
B. 150-200bp
C. 200-250bp
D. 250-300bp
E. 300-350bp
下列关于real-time PCR引物设计的原则中,不正确的是
A. 两条引物的Tm值相差尽量大
B. G+C的含量应在45%-55%之间
C. 尽量避免引物二聚体的出现
D. 反应体系中引物的浓度一般在0.1~0.2μmol/L之间
E. 引物过长可能提高退火温度